探究多功能酶标仪测定水果纤维素含量的方法

2020-10-30 10:15:40  来自: 鑫尔瑞

多功能酶标仪测定水果中的纤维素的目的:
1.纤维素是植物细胞壁的主要成分之一,纤维素含量的多少,关系到植物细胞机械组织发达与否。因而影响作物的抗倒伏,抗病虫害能力的强弱。测定粮食、蔬菜及纤维作物产品中纤维素含量是鉴定其品质好坏的重要指标。
2.熟悉多功能酶标仪的操作方法。
3.根据水果所含的纤维素含量来合理的选择日常所食水果。
纤维素(cellulose)为β——葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热能分解成β——葡萄糖。β——葡萄糖在强酸作用下,可脱水生成β——糠醛类化合物。β——糠醛类化合物与蒽酮脱水缩合,生成黄色的糠醛衍生物。颜色的深浅可间接定量测定纤维素含量。
实验前准备(以苹果为例)
(1)样品预处理:从样品中用溶剂将纤维素溶解。
(2)仪器和试剂
1.主要仪器 恒温水浴、冰罐、电炉、玻璃坩埚、漏斗、定时钟、多功能酶标仪等。
2.试 剂 60% H2SO4溶液、浓H2SO4。 2%蒽酮试剂:2g蒽酮溶解于100rnl乙酸乙酯中,贮置于棕色试剂瓶中。
3.纤维素标准液:准确称取100mg纯纤维素,放入100ml量瓶中,将量瓶放入冰浴中,然后加冷的60%H2SO4 60— 70ml,在冷的条件下消化处理 20—30min,然后用60%H2SO4稀释至刻度,摇匀。吸取此液5.0ml放入另一50ml量瓶中,将量瓶放入冰浴中,加蒸馏水稀释刻度,则每毫升含100μg纤维素。
4.绘制纤维素标准曲线
5.以所测得的吸光度为纵坐标,以纤维素含量为横坐标,绘制纤维素标准曲线。
(5)样品的测定

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